| 代谢工程改造大肠杆菌合成L-异亮氨酸的研究 |
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| 引用本文： | 李燕军,张海宾,麻杰,张成林,谢希贤,陈宁.代谢工程改造大肠杆菌合成L-异亮氨酸的研究[J].发酵科技通讯,2016(3):133-139. |
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| 作者姓名： | 李燕军 张海宾 麻杰 张成林 谢希贤 陈宁 |
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| 作者单位： | 1. 天津科技大学生物工程学院,天津300457;代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室,天津300457;天津市氨基酸高效绿色制造工程实验室,天津300457;2. 天津科技大学生物工程学院,天津,300457 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31300069)，天津市大学生创新创业训练计划项目(201510057063)，天津市科技特派员项目(15JCTPJC62800) |
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| 摘 要： | 以L-苏氨酸生产菌Escherichia coli THRD为出发菌株,利用基因重组技术替换ilvLXGMEDA启动子并过表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvA和ilvIH,以期获得L-异亮氨酸生产菌.将ilvLXGMEDA启动子替换为强启动子Ptrc并敲除ilvLXGM后获得ILE01菌株,于该菌株中分别过表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvIH及共表达解除L-异亮氨酸反馈抑制的ilvA和ilvIH,获得菌株ILE02和ILE03,其L-异亮氨酸产量分别达到1.75 g/L和2.19g/L.针对ILE03 α-酮丁酸积累量过高的问题,通过改变操纵子中ilvA和ilvIH的顺序调节其转录水平,获得菌株ILE04,其L-异亮氨酸产量达2.85 g/L.利用ILE04于5L发酵罐中进行发酵实验,L-异亮氨酸产量、发酵强度及转化率分别为5.23 g/L、0.17 g/(L·h)及4.6％.
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| 关 键 词： | L-异亮氨酸 大肠杆菌 反馈抑制 苏氨酸脱水酶 乙酰羟基酸合成酶 |
Study on metabolic engineering of Escherichia coli for L-isoleucine production |
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