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黑曲霉T3-5-1高活力单宁酶的制备及其性质研究
引用本文:张帅,陈遂,黄景晟,林健辉,农嘉仪,朱华伟,曹庸.黑曲霉T3-5-1高活力单宁酶的制备及其性质研究[J].现代食品科技,2014,30(3):137-143.
作者姓名:张帅  陈遂  黄景晟  林健辉  农嘉仪  朱华伟  曹庸
作者单位:(1 华南农业大学食品学院,广东广州 510642)(2 肇庆学院化学化工学院,广东肇庆 526061);广州市质量监督检测研究院,广东广州 510110;广州市质量监督检测研究院,广东广州 510110;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642;华南农业大学食品学院,广东广州 510642
基金项目:广东省教育部产学研结合项目(2011B090400183)
摘    要:用黑曲霉T3-5-1生产单宁酶,将粗酶液分别采用硫酸铵沉淀法和透析法初步纯化,结果表明,使用截留分子量12 kDa的透析袋对粗酶液透析后的比活力(3108.58 U/mg),高于硫酸铵沉淀法处理后的比活力(2939.38 U/mg)。然后对透析样品用Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析法进一步纯化,得到纯度较高的单宁酶,通过与单宁酶A及单宁酶B进行GPC色谱图比较发现,其分子量基本一致,但黑曲霉T3-5-1单宁酶的比活力(5304.78 U/mg),远高于单宁酶A(1788.15 U/mg)和单宁酶B(935.07 U/mg)的比活力。该单宁酶性质研究表明:其最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃,且其酸碱稳定性和热稳定性良好。当底物为没食子酸丙酯时,最大酶促反应速率Vmax为81.96μmol/(L·min),米氏常数Km为0.85 mmol/L。最后考察了该单宁酶的催化合成能力,结果表明,在AOT异辛烷反胶束体系中,该单宁酶可催化没食子酸和丙醇反应合成没食子酸丙酯。

关 键 词:黑曲霉T--  单宁酶  纯化  酶学性质  反胶束
收稿时间:2013/8/20 0:00:00

Preparation and Properties of High Activity Tannase with Aspergillus niger T3-5-1
ZHANG Shuai,CHEN Sui,HUANG Jing-sheng,LIN Jian-hui,NONG Jia-yi,ZHU Hua-wei and CAO Yong.Preparation and Properties of High Activity Tannase with Aspergillus niger T3-5-1[J].Modern Food Science & Technology,2014,30(3):137-143.
Authors:ZHANG Shuai  CHEN Sui  HUANG Jing-sheng  LIN Jian-hui  NONG Jia-yi  ZHU Hua-wei and CAO Yong
Affiliation:(1.College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China) (2.College of Chemistry and Chemical Engineering, Zhaoqing University, Zhaoqing 526061, China);Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute, Guangzhou 510110, China;Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute, Guangzhou 510110, China;College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
Abstract:
Keywords:Aspergillus niger T3-5-1  tannase  purification  enzymatic properties  reverse micelle
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