| 编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达 |
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| 引用本文： | 王玉海,岳娟,王鹏,林晓珊,张毅.编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达[J].现代食品科技,2014,30(9):67-72. |
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| 作者姓名： | 王玉海 岳娟 王鹏 林晓珊 张毅 |
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| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006;华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006;华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006;华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006;华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006 |
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| 摘 要： | 为了大量获得果糖基转移酶,本文通过RT-PCR扩增获得米曲霉果糖基转移酶基因,连接到大肠杆菌pEASY-E1质粒上,并转化到大肠杆菌BL21-DE3菌株中成功表达,通过对重组菌诱导表达条件的优化,最终确定在诱导温度为25℃,诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度为1.0μmol/mL的条件下,该重组酶可以顺利表达。利用重组质粒PEASY-S1上的6×组氨酸标签,用亲和层析的方法纯化能够得到较高纯度的果糖基转移酶。以蔗糖为底物,用该酶进行果糖基转化生产低聚果糖的实验结果表明:重组果糖基转移酶具有一定催化能力,其酶活力达到59.0 U/g,且在低温诱导时稳定表达,具备一定的潜在开发利用价值。本实验成功在大肠杆菌中重组表达出果糖基转移酶,并且能够短时间内、大量表达具有催化活性的果糖基转移酶,可望为果糖基转移酶的工业化提供理论基础。
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| 关 键 词： | 蔗果寡糖 果糖基转移酶 大肠杆菌 蛋白表达 |
| 收稿时间： | 2014/3/11 0:00:00 |
Recombinant Expression of Fructosyl Transferase Gene of Aspergillus oryzae in Escherichia coli |
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| WANG Yu-hai,YUE Juan,WANG Peng,LIN Xiao-shan and ZHANG Yi.Recombinant Expression of Fructosyl Transferase Gene of Aspergillus oryzae in Escherichia coli[J].Modern Food Science & Technology,2014,30(9):67-72. |
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| Authors: | WANG Yu-hai YUE Juan WANG Peng LIN Xiao-shan and ZHANG Yi |
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| Affiliation: | School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China;School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China;School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China;School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China;School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fructo-oligosaccharide fructosyl transferase E coli protein expression |
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