| 磷酸酶抑制比色法快速测定贝类中腹泻性贝毒素 |
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| 引用本文： | 郭萌萌,吴海燕,薛瑞宇,谭志军,李兆新,翟毓秀.磷酸酶抑制比色法快速测定贝类中腹泻性贝毒素[J].现代食品科技,2014,30(6):263-267. |
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| 作者姓名： | 郭萌萌 吴海燕 薛瑞宇 谭志军 李兆新 翟毓秀 |
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| 作者单位： | 农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071;农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071;青岛科技大学化学与分子工程学院，山东青岛 266042;农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071;农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071;农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（41106109）；中央级基本科研业务费项目（20603022011004、20603022012019） |
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| 摘 要： | 基于腹泻性贝毒素(Diarrhetic shellfish poisoning,DSP)的致腹泻性组分大田软海绵酸(okadaic acid,OA)及其衍生物鳍藻毒素(dinophysistoxins,DTXs)能抑制蛋白磷酸酶活性的特点,建立了快速测定贝类中DSP的磷酸酶抑制比色分析方法。采用对硝基苯磷酸二钠(p-nitrophenyl phosphate disodium,p-NPP)为底物,其与蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)反应生成的黄色水解产物在碱性条件下于405 nm波长处有强烈的吸收峰,根据吸光度值计算抑制剂的浓度。酶抑制法继承了小鼠生物法能建立剂量-效应关系的优势,直接反映毒素的相对毒性大小,测定的是DSP毒素致腹泻性成分的总量,以OA浓度计。本研究优化了样品前处理方法并考察了基质浓度的影响。方法的筛选检出限为80μg/kg。采用该方法进行加标回收实验,回收率在90.43%~118.52%范围内,相对标准偏差(RSD)为6.85%~13.93%。该方法操作简便、快捷,回收率高,重现性好,可作为快速筛查工具用于贝毒的日常监控。
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| 关 键 词： | 磷酸酶 比色法 大田软海绵酸 腹泻性贝毒素 贝类 |
| 收稿时间： | 2014/1/23 0:00:00 |
Rapid Determination of Diarrhetic Shellfish Poisoning in Shellfish by Colorimetric Protein Phosphatase Inhibition Assay |
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| GUO Meng-meng,WU Hai-yan,XUE Rui-yu,TAN Zhi-jun,LI Zhao-xin and ZHAI Yu-xiu.Rapid Determination of Diarrhetic Shellfish Poisoning in Shellfish by Colorimetric Protein Phosphatase Inhibition Assay[J].Modern Food Science & Technology,2014,30(6):263-267. |
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| Authors: | GUO Meng-meng WU Hai-yan XUE Rui-yu TAN Zhi-jun LI Zhao-xin and ZHAI Yu-xiu |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Testing and Evaluation for Aquatic Product Safety and Quality, Ministry of Agriculture, P. R. China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;Key Laboratory of Testing and Evaluation for Aquatic Product Safety and Quality, Ministry of Agriculture, P. R. China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;College of Chemistry and Molecular Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao 266042, China;Key Laboratory of Testing and Evaluation for Aquatic Product Safety and Quality, Ministry of Agriculture, P. R. China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;Key Laboratory of Testing and Evaluation for Aquatic Product Safety and Quality, Ministry of Agriculture, P. R. China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;Key Laboratory of Testing and Evaluation for Aquatic Product Safety and Quality, Ministry of Agriculture, P. R. China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phosphatases colorimetric analysis okadaic acid diarrhetic shellfish poisoning shellfish |
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