山楂原花青素和VC联合通过Wnt/β-catenin通路减轻胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激

目的：探讨山楂原花青素（hawthorn proanthocyanidin,HPC）和VC联合通过Wnt/β-catenin通路减轻胰岛素抵抗大鼠氧化应激的机制。方法：80 只雄性Wistar大鼠通过高脂膳食法建立胰岛素抵抗模型,10 只饲喂普通饲料作为对照组,检测大鼠造模前后体质量变化和造模后空腹血糖、血清胰岛素浓度,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力;随机选取50 只造模成功的胰岛素抵抗大鼠分为模型组、HPC组（56 μg/mL）、VC组（180 μg/mL）、HPC（56 μg/mL）＋VC（180 μg/mL）组和二甲双胍（2 μg/mL）组,每组各10 只。连续给药12 周,测定各组大鼠血液中葡萄糖、胰岛素浓度以及肝匀浆中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPx）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）的水平;实时定量聚合酶链式反应检测Wnt1、轴蛋白（Axin）、糖原合酶激酶-3β（glycogen synthasc kinase-3β,GSK-3β）、腺瘤样息肉病蛋白（adenomatous polyposis coli protein,APC）、β-catenin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptors γ,PPARγ）的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测肝组织Wnt1、β-catenin和PPARγ的蛋白表达水平;荧光共振能量转移分析法检测Wnt1和Dsh蛋白结合的情况。结果：80 只大鼠给予高脂膳食喂养,有54 只造模成功,成功率67.5%。造模后,模型组大鼠的体质量以及空腹血糖、血清胰岛素、ALT、AST和ALP水平均极显著高于对照组大鼠（P＜0.01）。与模型组相比,HPC组、HPC＋VC组和二甲双胍组大鼠肝匀浆中各指标水平均有极显著差异（P＜0.01）,HPC＋VC组对肝匀浆中各指标干预效果显著优于HPC组（P＜0.05）;HPC＋VC组Wnt1和β-catenin的mRNA相对表达水平极显著降低（P＜0.01）,Axin、GSK-3β、APC和PPARγ的mRNA相对表达水平极显著升高（P＜0.01）;HPC＋VC组Wnt1和β-catenin的蛋白相对表达水平极显著降低（P＜0.01）,PPARγ的蛋白表达水平极显著升高（P＜0.01）;HPC＋VC组的荧光共振能量转移信号明显减弱,说明随着时间的延长,Wnt1与Dsh之间的结合力明显减弱,形成的异源二聚体数量明显减少。结论：HPC和VC联合可通过Wnt/β-catenin通路改善胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激状况。