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| 层析技术制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒F(ab’)_2 | |
| 作者单位： | ;1.吉林大学动物医学学院;2.军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;4.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 |
| 摘 要： | 目的采用层析技术制备高纯度的马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrom coronavirus,MERS-CoV)F(ab’)_2。方法以MERS-CoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,采用亲和层析技术提取血清IgG,经胃蛋白酶酶切后,通过阴离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析分别对F(ab’)_2进行纯化;以MERS假病毒检测所制备的IgG与F(ab’)_2中和活性。结果凝胶过滤层析实现了F(ab’)_2的高纯度分离,最终制备的F(ab’)_2收率约70%,纯度为93%以上,具有良好的中和活性,其半数抑制浓度(IC_(50))为5.13μg/ml。结论制备了高纯度马抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)_2,为人用抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)_2生产工艺的建立奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 中东呼吸综合征 冠状病毒 病毒样颗粒 层析 免疫球蛋白 |
Preparation of equine neutralizing F(ab')_2 against Middle East respiratory syndrom coronavirus by chromatography |
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