| 纯化大肠杆菌表达胆固醇氧化酶的两种亲和分离介质的研究 |
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| 引用本文： | 辛瑜,张玲,张玉然,陈亦,仝艳军,王武.纯化大肠杆菌表达胆固醇氧化酶的两种亲和分离介质的研究[J].食品与生物技术学报,2012,31(6):599-605. |
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| 作者姓名： | 辛瑜 张玲 张玉然 陈亦 仝艳军 王武 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡214122 |
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| 基金项目： | 江苏省科技支撑计划项目，江南大学自主科研计划青年基金 |
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| 摘 要： | 建立了从重组菌中高效亲和制备胆固醇氧化酶的方法,将一种源自Brevibacterium sp.(DQ345780)的胆固醇氧化酶基因转入Escherichia co●BL21(DE3)表达,,选择核黄素-5’磷酸(FMN)及7-氯-异咯嗪作为亲和配体,构建胆固醇氧化酶亲和制备介质。通过两种介质的一步亲和吸附,获得纯度较高的胆固醇氧化酶样本,蛋白回收率分别为9.4%与9.9%(质量百分比),活性回收率分别为85.2%与93.4%(活性百分比)。使用SDS-PAGE分析,纯化得到蛋白分子量为约50 000,纯度分别为98.0%与97.5%(纯度百分比)。通过静态吸附分析,胆固醇氧化酶相对两种亲和介质的最大理论吸附值分别为71.0与78.5 mg/g介质;解离常数分别为12.8和7.3μg/g介质。
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| 关 键 词： | 胆固醇氧化酶 大肠杆菌 核黄素 异咯嗪 亲和分离 |
The Research of Two Affinity Mediums for the Purification of a Cholesterol Oxidase(COD) Expression in Escherichia coli |
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| XIN Yu,ZHANG Ling,ZHANG Yu-ran,CHEN Yi,TONG Yan-jun and WANG Wu.The Research of Two Affinity Mediums for the Purification of a Cholesterol Oxidase(COD) Expression in Escherichia coli[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2012,31(6):599-605. |
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| Authors: | XIN Yu ZHANG Ling ZHANG Yu-ran CHEN Yi TONG Yan-jun and WANG Wu |
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| Affiliation: | * (Key Laboratory of Industrial Biotechnology,Ministry of Education,Jiangnan University.Wuxi 214122,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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