| 沙门氏菌噬菌体SM-p2内溶酶及穿孔素的生物信息学分析和克隆表达 |
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| 引用本文： | 戚斌,解天慧,石慧. 沙门氏菌噬菌体SM-p2内溶酶及穿孔素的生物信息学分析和克隆表达[J]. 中国食品学报, 2022, 22(8): 32-39 |
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| 作者姓名： | 戚斌 解天慧 石慧 |
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| 作者单位： | 西南大学食品科学学院 重庆 400715 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(32072322) |
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| 摘 要： | 沙门氏菌是常见的危害公共安全的食源性致病菌。内溶酶和穿孔素作为新型生物抑菌剂，是噬菌体编码的具有细菌裂解作用的功能蛋白。本文利用十聚寡核苷酸引物和PCR技术对噬菌体SM-p2的DNA进行随机扩增并确定穿孔素基因Hol 2和内溶酶基因Lys 2；使用生物学信息软件分析预测Lys 2和Hol 2的特性；利用大肠杆菌原核表达系统对Lys 2和Hol 2进行克隆表达。结果表明:噬菌体SM-p2是一种具有“穿孔素-内溶酶”裂解体系的双链DNA烈性噬菌体。经生物信息学分析发现，Hol 2是一种仅有一个跨膜结构的Ⅲ型穿孔素，Lys 2是一种没有跨膜结构肽聚糖水解酶。利用大肠杆菌表达系统成功表达了Lys 2和Hol 2，然而，穿孔素能直接裂解细菌细胞内膜，对感受态表达细胞产生毒害作用，导致Hol 2表达量较少。最终获得质量浓度为5.419 mg/mL的内溶酶Lys 2和2.191 mg/mL的穿孔素Hol 2。本研究成功表达了沙门氏菌噬菌体SM-p2的内溶酶和穿孔素，为SM-p2的抑菌研究奠定了分子基础。
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| 关 键 词： | 噬菌体； 基因克隆； 内溶酶； 穿孔素 |
| 收稿时间： | 2021-08-02 |
Bioinformatics Analysis and Cloning Expression of Endolysin and Holin in Salmonella Phage SM-p2 |
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| Qi Bin,Xie Tianhui,Shi Hui. Bioinformatics Analysis and Cloning Expression of Endolysin and Holin in Salmonella Phage SM-p2[J]. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2022, 22(8): 32-39 |
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| Authors: | Qi Bin Xie Tianhui Shi Hui |
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