人颗粒蛋白A的表达、优化及抗肿瘤活性研究

为了探究人颗粒蛋白A(HGRNA)的抗肿瘤活性,克隆HGRNA并转入毕赤酵母发酵表达,蛋白用Ni²⁺构成的金属螯合亲和层析柱(MCAC)纯化。根据培养毕赤酵母菌落的条件,利用响应面分析法优化并确定出毕赤酵母的最优发酵条件:通气量0.13 m L×min^-1、豆粉质量分数1.6%、发酵温度24.5℃、发酵初始pH 6.6。利用MTT法分析HGRNA的抗肿瘤作用,结果表明对人肾细胞293T无细胞毒性,对人结肠癌细胞SW480、人胰腺癌细胞SW1990、人非小细胞肺癌细胞A549有明显的抑制作用,IC50值分别约为89.7、106.2、100.8μg×mL^-1,且抑制效果呈剂量依赖型。结果表明HGRNA具有作为新型抗癌药的潜力。