| 提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性 |
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| 引用本文： | 杨丹燕,林陈水.提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性[J].浙江工业大学学报,2009,37(4). |
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| 作者姓名： | 杨丹燕 林陈水 |
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| 作者单位： | 浙江工业大学,药学院,浙江,杭州,310032 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 以E.coli DH5a基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T栽体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coli BL21(DE3)和E.coli origami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coli origami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coli BL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coli origami(DE3)中蛋白活性比E.coli BL21(DE3)中明显提高,达到1 614.3U/mg蛋白.
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| 关 键 词： | 碱性磷酸酶 可溶性 活性 |
Improving the solubility and activity of alkaline phosphatase expression in E.coli cytoplasm |
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| YANG Dan-yan,LIN Chen-shui.Improving the solubility and activity of alkaline phosphatase expression in E.coli cytoplasm[J].Journal of Zhejiang University of Technology,2009,37(4). |
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| Authors: | YANG Dan-yan LIN Chen-shui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | E coli BL21(DE3) E coli origami(DE3) |
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