| 纤维素酶E5基因在E．coli中的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 沈雪亮,夏黎明,刘景晶.纤维素酶E5基因在E．coli中的克隆与表达[J].浙江大学学报(自然科学版 ),2001,35(6):640-644. |
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| 作者姓名： | 沈雪亮 夏黎明 刘景晶 |
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| 作者单位： | [1]浙江大学化学工程与生物工程系，浙江杭州310027 [2]中国药科大学生物制药学院，江苏南京210009 |
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| 基金项目： | 浙江省重大国际合作交流项目(112104J39981). |
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| 摘 要： | 将含纤维素酶E5基因的质粒pD541用Nco Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后，经电泳分离获取含E5基因的小片段，将该片段定向插入表达质粒pSE420的多克隆位点上，进一步将重组DNA转人大肠杆菌宿主．采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶(CMCase)活性．摇瓶产酶试验进一步表明，基因重组后的大肠杆菌能高效表达E5基因并将产物分泌出胞外，培养液中可检测到的CM-Case活力达31．6U／mL．该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础，具有重要的学术意义和实际应用价值．
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| 关 键 词： | 纤维素酶 E5基因 重组 表达 胞外分泌 |
| 文章编号： | 1008-973X(2001)06-0640-05 |
| 修稿时间： | 2000年5月6日 |
Recombination and expression of cellulase E5 gene |
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