| 酵母多基因表达载体在纤维素生物转化中应用 |
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| 引用本文： | 龚映雪,台艳,肖文娟,王峻梅,唐根云,全艳彩,刘泽寰.酵母多基因表达载体在纤维素生物转化中应用[J].深圳大学学报(理工版),2010,27(1). |
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| 作者姓名： | 龚映雪 台艳 肖文娟 王峻梅 唐根云 全艳彩 刘泽寰 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命与健康工程研究院,广州,510632 |
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| 基金项目： | 教育部新世纪优秀人才支持计划，珠海市科技攻关资助项目 |
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| 摘 要： | 构建含酿酒酵母组成型强启动子PGK、G418抗性基因及rDNA片段的整合型载体pScIKP,利用rDNA多个同源重组位点,将外源基因以多拷贝整合到酵母染色体上,无需诱导即可持续表达;利用载体位于表达盒两端同尾酶,可插入多个基因表达盒,实现多基因稳定共表达.为检验共表达情况,反转录从绿色木霉中获得纤维素酶基因eg3和cbh2, 克隆并转化获得重组酵母菌株S.cerevisiae-ec. 该重组酵母能降解羧甲基纤维素形成水解圈;用羧甲基纤维素还原糖法和滤纸酶活力法测定酶活力,其最适温度和最适pH值与所表达单酶相似,表明共表达未影响两种酶的生物学特性;且双酶具有协同作用,能更有效降解非结晶纤维素.pScIKP载体能成功用于多个外源基因共表达和产物协同作用的研究,为构建能直接降解纤维素的酿酒酵母菌株,实现纤维素可再生能源的生物利用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 基因工程 可再生能源 纤维素 生物转化 酿酒酵母 多基因共表达 绿色木霉 内切葡聚糖酶 纤维二糖水解酶 |
Construction of Saccharomyces cerevisiae integrated expression vector and its application in cellulose bioconvesion |
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| GONG Ying-xue,TAI Yan,XIAO Wen-juan,WANG Jun-mei,TANG Gen-yun,QUAN Yan-cai,LIU Ze-huan.Construction of Saccharomyces cerevisiae integrated expression vector and its application in cellulose bioconvesion[J].Journal of Shenzhen University(Science &engineering),2010,27(1). |
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| Authors: | GONG Ying-xue TAI Yan XIAO Wen-juan WANG Jun-mei TANG Gen-yun QUAN Yan-cai LIU Ze-huan |
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| Affiliation: | GONG Ying-xue,TAI Yan,XIAO Wen-juan,WANG Jun-mei,TANG Gen-yun,QUAN Yan-cai,, LIU Ze-huan Institutes of Life , Health Engineering Jinan University Guangzhou 510632 P.R.China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | genetic engineering renewable energy resource cellulose bioconversion Saccharomyces cerevisiae multigene co-expression Trichoderma viride endoglucanase cellobiohydrolase |
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