Detection of casein, soy proteins and coagulated egg-white in meat products by electrophoresis on cellulose acetate membranes

Summary A rapid method has been developed for the detection of casein, soy protein and coagulated egg-white in meat products. Fat and serum proteins are removed by hot water extraction. Casein and soy proteins are extracted with 8 M urea. Coagulated egg-white is subsequently extracted with a fresh mixture of 8 M urea/0.15 M thioglycol (9:1). The proteins are precipitated with an acetate buffer of pH 4.6 which is added in 4-fold excess to the urea extract. After isolation and washing of the precipitate the proteins are dissolved in urea or urea/thioglycol and subjected to electrophoresis on cellulose acetate membranes in a suitable buffer system, viz. barbitone/urea pH 8.5 for casein and formic acid/urea pH 4.0 for soy proteins e.q. egg-white. About 0.1% of casein, soy protein and 0.5% of egg-white added to meat products can be detected.

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Zusammenfassung Es wurde eine schnelle Methode zum Nachweis von Casein, Soja-Protein und coaguliertem Eiklar in Fleischerzeugnissen (Bratwurst usw.) entwickelt. Fett und Serumproteine werden mit heißem Wasser extrahiert; Casein und Soja-proteine mit einer 8m-Harnstoff-Lösung. Coaguliertes Eiklar wird dann mit einer frisch hergestellten Lösung von 8m-Harnstoff und 0,15 m-Thioglycol (9:1) extrahiert. Die Proteine werden mit einer Acetat-Puffer-Lösung von pH 4,6 in 4fachem Überschuß präzipitiert. Nach Isolierung und Waschung des Präcipitats werden die Proteine wieder in Harnstoff oder Harnstoff/Thioglycol gelöst und der Elektrophorese auf Celluloseacetat-Membranfiltern in einem geeigneten Puffersystem unterworfen, d. h. Barbitone/Harnstoff pH 8,5 für Casein und Ameisensäure/Harnstoff pH 4,0 für Soja-proteine und Eiklar. Die untere Nachweißgrenze liegt bei 0,1% für Casein und Soja-Proteine und bei 0,5% für Eiklar.