| 球毛壳菌α-葡聚糖酶的异源表达、纯化及特性表征 |
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| 引用本文： | 顾莉莉,周楠迪,田亚平. 球毛壳菌α-葡聚糖酶的异源表达、纯化及特性表征[J]. 食品与生物技术学报, 2021, 40(11): 30-38 |
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| 作者姓名： | 顾莉莉 周楠迪 田亚平 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡214122 |
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| 摘 要： | 利用毕赤酵母密码子偏好性优化合成球毛壳菌α-葡聚糖酶基因，并在毕赤酵母GS115中实现异源表达。通过高拷贝筛选和摇瓶发酵条件的单因素优化，重组α-葡聚糖酶的酶活力由初始的2.692 U/mL提高至47.915 U/mL。选择 Hitrap Q HP 和Hitrap SP HP 的双步层析分离将发酵粗酶液纯化至电泳纯，纯化倍数40.83，比活达277.61 U/mg，回收率为24.15%。纯酶最适温度和pH分别为60 ℃和5.5。在20~50 ℃和pH为4.5~8.5范围内稳定性良好，浓度为10 mmol/L的Fe2+对酶有激活作用，Cu2+浓度（0.1~10 mmol/L）越高对酶的抑制作用越强。酶动力学实验发现该重组酶对高相对分子质量的底物亲和力更高，葡聚糖T2000为该酶的最适底物。
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| 关 键 词： | α-葡聚糖酶；毕赤酵母；离子交换；电泳；特性表征 |
Heterologous Expression, Purification and Characterization of Alpha-Glucanase from Chaetomium globosum |
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| GU Lili,ZHOU Nandi,TIAN Yaping. Heterologous Expression, Purification and Characterization of Alpha-Glucanase from Chaetomium globosum[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2021, 40(11): 30-38 |
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| Authors: | GU Lili ZHOU Nandi TIAN Yaping |
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