重组β-半乳糖苷酶的制备及转化条件优化 |
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作者姓名: | 胡树兵 段绪果 吴敬 |
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作者单位: | 食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122 |
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摘 要: | 以前期构建的产Bacilluscirculansβ-半乳糖苷酶重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET-20b-lac为菌种,进行摇瓶发酵诱导培养,培养24 h胞外上清酶活达15 U/mL。利用制备的β-半乳糖苷酶粗酶液进行酶转化实验。优化了酶转化条件,考查了初始pH、反应温度、乳糖质量浓度、加酶量和反应时间等因素对低聚半乳糖产率的影响。确定最优转化条件为:初始pH 6.5、反应温度55℃,起始乳糖质量浓度为700 g/L,加酶量为8 U/mL。在此条件下反应16 h,低聚半乳糖转化率可达57%。
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关 键 词: | 低聚半乳糖;β-半乳糖苷酶;摇瓶发酵;酶转化;条件优化 |
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