| 鸡蛋主要过敏原Gal d 3基因的克降、表达、纯化及免疫学鉴定 |
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| 引用本文： | 吴序栎,杨志华,刘志刚,吴海强.鸡蛋主要过敏原Gal d 3基因的克降、表达、纯化及免疫学鉴定[J].食品科学,2009,30(1):142. |
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| 作者姓名： | 吴序栎 杨志华 刘志刚 吴海强 |
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| 作者单位： | 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳,518060
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，广东省科技重点专项项目，广东省深圳市科技计划，深圳大学校科研基金 |
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| 摘 要： | 目的:克隆表达鸡蛋主要过敏原Gal d 3基因并柃验其免疫活性.方法:提取鸡蛋的总RNA,采用RT-PCR方法扩增出目的基因片段,将其克隆入T载体中进行测序和分析.设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短的开放阅读框并将目的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中进行诱导表达.通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用免疫印迹(Western blotting)方法检测其IgE结合活性.结果:克隆获得了鸡蛋主要过敏原Gal d 3.基因开放阅读框为2118个碱基(包括终止密码子),编码705个氨基酸.该序列编码的蛋白等电点为6.5,相对分子质量约为76000.表达产物经亲和层析纯化,用Western blotting方法检测免疫学活性,目的蛋白具有良好的免疫原性.结论:成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原Gal d 3基因,该蛋白具有良好的免疫原性.
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| 关 键 词： | 鸡蛋 过敏原 基因克隆 表达 |
Gene Cloneing, Expression and Immunological Identification of Main Allergen Gal d 3 in Eggs |
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| WU Xu-li,YANG Zhi-hua,LIU Zhi-gang,WU Hai-qiang.Gene Cloneing, Expression and Immunological Identification of Main Allergen Gal d 3 in Eggs[J].Food Science,2009,30(1):142. |
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| Authors: | WU Xu-li YANG Zhi-hua LIU Zhi-gang WU Hai-qiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gald3 |
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