应用反向亲和层析纯化基因工程产品 |
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引用本文: | 牛瑞芳,黄建英,李希.应用反向亲和层析纯化基因工程产品[J].粉末涂料与涂装,1999(3). |
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作者姓名: | 牛瑞芳 黄建英 李希 |
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作者单位: | 天津市肿瘤医院研究所!天津300060 |
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摘 要: | 本文以rIL6的纯化为例进行实验。用超声破碎的方法提取出菌体蛋白粗提物和非相关包涵体杂质蛋白(rIL2包涵体),进而用常规免疫法制备兔抗菌体蛋白和包涵体杂质蛋白抗血清。从抗血清中用亲和层析法分离出抗菌体蛋白和包涵体杂质蛋白的特异IgG,然后偶联CNBr激活的Sepharose4B,制成抗菌体蛋白IgG和抗包涵体杂质蛋白IgG的亲和层析柱,即反向亲和柱Ⅰ和反向亲和柱Ⅱ。将反向柱Ⅰ和反相柱Ⅱ分别用01mol/LTrisHC1(pH80)平衡,用8mol/L尿素溶液溶解包涵体,稀释复性后经过反向柱Ⅰ纯化,rIL6含量达到79%…
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