| 热纤梭菌β-葡聚糖酶基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 吕文平, 乐国伟, 韩晋辉.热纤梭菌β-葡聚糖酶基因的克隆和表达[J].中国食品学报,2006,6(1):320-324. |
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| 作者姓名： | 吕文平 乐国伟 韩晋辉 |
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| 作者单位： | 江南大学食品学院,食品营养与安全教育部重点实验室,无锡,214036 |
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| 摘 要： | 提取热纤梭菌(Clostridium.sp)基因组DNA,首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长。结果表明:该基因全长1040bp,ORF为1003bp,编码334个氨基酸,计算分子质量为37.8kD,等电点为7.67。经Blast分析,该序列与热纤梭菌同源性最高(99%),而与基因库中嗜热梭菌的同源性为94%,该基因已被GenBank接受(AY225318)。用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段和表达载体pET-30a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-clo,并导入BL21细菌中表达。酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在37kD左右有表达蛋白带,该工程菌最适酶活29.4U/mL,是出发菌的15倍,最适温度80℃,最适pH9。该工程菌可作为耐热性材料构建耐热性好、酶活高的杂合基因工程菌。
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| 关 键 词： | β-葡聚糖酶 热纤梭菌 克隆 大肠杆菌 表达 |
| 文章编号： | 1009-7848(2006)01-0320-05 |
| 修稿时间： | 2005年8月25日 |
Cloning and Expression of β-glucanase Gene from Clostridium. sp |
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| Lv Wenping,Le Guowei,Han Jinhui.Cloning and Expression of β-glucanase Gene from Clostridium. sp[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2006,6(1):320-324. |
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| Authors: | Lv Wenping Le Guowei Han Jinhui |
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