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| 毕赤酵母高效表达重组β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导方法研究 | |
| 作者姓名： | 张斌 任延鹏 梁艳明 张婉婧 孙倩 李春 曹红 |
| 作者单位： | 石河子大学化学化工学院;石河子大学食品学院; |
| 基金项目： | 2009年度国家大学生创新性实验计划项目“离子液体中酶法合成GAMG的研究”; 教育部科学技术研究重点项目“固定化β-葡萄糖醛酸苷酶在离子液体中催化合成GAMG的研究”(209146); 石河子大学高层次人才科研启动资金专项“酶膜生物反应器制备GAMG的研究”(RCZX200805)资助 |
| 摘 要： | 将甘草酸生物转化合成GAMG已成为国内外医药和食品行业研究的热点。该文在前期构建毕赤酵母(pichia pastoris)工程菌GS115-GUS的基础上,对重组毕赤酵母工程菌发酵条件进行了研究。通过单因素及正交试验建立工程菌最佳表达β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导产酶方法:重组毕赤酵母GS115-GUS菌株在液体YPD培养基中活化24 h后,接种到BMGY中富集菌体,OD600达到6.0时,按照1∶1(V/V)的接种比率接入到pH为6.0的BMMY培养基中,加入1.5%诱导剂甲醇诱导产酶,且每隔24 h添加一次。该诱导产酶条件简单、易行、科学、合理,毕赤酵母高效表达GAMG的酶活高达1.97×103 U/mL,研究结果达到预期目标,为进一步研究重组酵母工程菌产β-葡萄糖醛酸苷酶的发酵水平、β-葡萄糖醛酸苷酶生物催化甘草酸制备GAMG以及工业化生产奠定基础。 |
| 关 键 词： | 毕赤酵母 摇瓶发酵 发酵条件优化 甲醇诱导 β-葡萄糖醛酸苷酶 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |