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耐盐芽孢杆菌R1高效壳聚糖酶异源表达及特性分析
引用本文:钟斌,余思,陈微,王平,祝木金,王永华,王建荣.耐盐芽孢杆菌R1高效壳聚糖酶异源表达及特性分析[J].食品与生物技术学报,2023,42(9):10-19.
作者姓名:钟斌  余思  陈微  王平  祝木金  王永华  王建荣
作者单位:深圳润康生态环境股份有限公司,广东 深圳 518102; 华南理工大学 食品科学与工程学院,广东 广州 510641; 深圳诺普信农化股份有限公司,广东 深圳 518102
摘    要:采用同源克隆获得耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶基因,并异源表达制备重组耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶(CsnBh46),通过表征分析获得重组CsnBh46酶学特性。重组CsnBh46全长278个氨基酸,三维结构显示其分为上下两个半球,包含9个α螺旋和2个β折叠。在7 L发酵罐中,重组工程菌bh-5的最高酶活力和总蛋白质质量浓度分别为6 375 U/mL和4.3 g/L。纯化后的重组CsnBh46最适反应pH和温度分别为6.0和60 ℃,金属离子Mn2+、Ca2+和Mg2+对重组CsnBh46具有激活作用。重组CsnBh46最适底物为脱乙酰度95%胶体壳聚糖。重组CsnBh46能够高效水解胶体壳聚糖并且根据反应时间可以定向制备不同聚合度壳寡糖。本研究为CsnBh46产业化应用奠定基础。

关 键 词:耐盐芽孢杆菌R1  壳聚糖酶  毕赤酵母  重组表达  壳寡糖

Heterologous Expression and Characterization Analysis of a High-Efficiency Chitosanase from Bacillus halotolerans R1
ZHONG Bin,YU Si,CHEN Wei,WANG Ping,ZHU Mujin,WANG Yonghu,WANG Jianrong.Heterologous Expression and Characterization Analysis of a High-Efficiency Chitosanase from Bacillus halotolerans R1[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2023,42(9):10-19.
Authors:ZHONG Bin  YU Si  CHEN Wei  WANG Ping  ZHU Mujin  WANG Yonghu  WANG Jianrong
Affiliation:Shenzhen Raink Ecology & Environment Co., Ltd., Shenzhen 518102, China; School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510641, China; Shenzhen Noposion International Investment Co., Ltd., Shenzhen 518102, China
Abstract:
Keywords:Bacillus halotolerans R1  chitosanase  Pichia pastoris  heterologous expression  chitosan oligosaccharides
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