| 克雷伯氏菌产β-半乳糖苷酶的异源表达及低聚半乳糖合成工艺优化 |
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| 引用本文： | 李宗显,许丽亚,朱运平,郦金龙,李秀婷,.克雷伯氏菌产β-半乳糖苷酶的异源表达及低聚半乳糖合成工艺优化[J].中国食品学报,2021,21(8):245-251. |
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| 作者姓名： | 李宗显 许丽亚 朱运平 郦金龙 李秀婷 |
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| 作者单位： | 北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心；北京工商大学食品质量与安全北京实验室；北京工商大学食品与健康学院； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（31771960）； 人才培养质量建设-一流专业建设项目（PXM2019＿014213＿000010） |
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| 摘 要： | β-半乳糖苷酶是低聚半乳糖制备过程中的关键酶。本文克隆生菌株克雷伯氏菌B5582Y的β-半乳糖苷酶基因lacZ,并成功构建大肠杆菌重组质粒pET28a-24。经IPTG诱导表达其酶活力比野生菌株提升近10倍。通过单因素及响应面法考察重组酶对低聚半乳糖合成的影响,得到最佳工艺条件为:加酶量130 U/mL,温度44℃,底物添加量90%,pH 7.0～7.5,反应时间10 h,低聚半乳糖的产率达44%。重组酶表现出较好的转糖苷活性,在低聚半乳糖合成领域具有较大的应用潜力。
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| 关 键 词： | 克雷伯氏菌B5582Y β-半乳糖苷酶 异源表达 最佳工艺 低聚半乳糖 |
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