| 稀释复性法体外复性重组牛凝血酶原-2包涵体 |
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| 引用本文： | 陈建梁,关怡新,崔志芳,姚善泾.稀释复性法体外复性重组牛凝血酶原-2包涵体[J].高校化学工程学报,2005,19(2):228-232. |
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| 作者姓名： | 陈建梁 关怡新 崔志芳 姚善泾 |
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| 作者单位： | 浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(20476093)，浙江省自然科学基金资助项目(201099)。 |
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| 摘 要： | 对重组牛凝血酶原-2包涵体的体外重折叠复性进行了研究。凝血酶原-2是α-凝血酶生成过程中的一个最小的单链中间前体。重组牛凝血酶原-2在E.coli中高效表达并形成包涵体,经2.5mol?L?1脲和0.7%Triton X-100洗涤,再用8mol?L?1脲和0.3mol?L?1DTT溶解后,得到了包涵体裂解液。研究优化了体外复性溶液,其组成为含2.7mol?L?1脲、0.6mmol?L?1GSSG、GSSG/GSH0.9、0.1%PEG6000和0.5mol?L?1L-Arg、pH7.4Na3PO4缓冲液。牛凝血酶原-2复性后经透析,再被Echis Carinatus Snake Venom激活,转化为有活性的α-凝血酶,其总活力可达2948U?mL?1。结果表明稀释复性法可用于重组牛凝血酶原-2包涵体的体外重折叠复性。
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| 关 键 词： | 重组牛凝血酶原-2 复性 包涵体 一次回归正交试验 |
| 文章编号： | 1003-9015(2005)02-0228-05 |
| 修稿时间： | 2004年8月4日 |
Renaturation of Recombinant Bovine Prethrombin-2 in vitro from Inclusion Bodies in E. Coli |
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| CHEN Jian-liang,GUAN Yi-xin,CUI Zhi-fang,YAO Shan-jing.Renaturation of Recombinant Bovine Prethrombin-2 in vitro from Inclusion Bodies in E. Coli[J].Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities,2005,19(2):228-232. |
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| Authors: | CHEN Jian-liang GUAN Yi-xin CUI Zhi-fang YAO Shan-jing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant bovine prethrombin-2 refolding inclusion body linear regression orthogonal experiment |
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