| 小鼠PARP-1基因RNAi表达质粒的构建与筛选 |
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| 引用本文： | 王铁君,韩成敏,李星花,尹金植,陈玉丙,王红勇,李英普.小鼠PARP-1基因RNAi表达质粒的构建与筛选[J].粉末涂料与涂装,2009,22(2). |
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| 作者姓名： | 王铁君 韩成敏 李星花 尹金植 陈玉丙 王红勇 李英普 |
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| 作者单位： | 王铁君,尹金植,陈玉丙,王红勇,李英普(吉林大学第二医院肿瘤放疗科,长春,130012);韩成敏(吉林大学口腔医院内镜中心,长春,130012);李星花(吉林大学第一医院呼吸内科,长春,130012) |
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| 基金项目： | 吉林省科技发展计划项目，省科委白求恩专项基金 |
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| 摘 要： | 目的构建并筛选小鼠聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1(PARP-1)基因的RNAi表达质粒,为肿瘤基因治疗探索新途径。方法根据GenBank中报道的PARP-1基因序列及shRNA设计原则,设计、合成用于构建RNAi质粒的寡核苷酸,构建4种重组PARP-1RNAi质粒,酶切及测序鉴定正确后,以脂质体LipofectamineTM2000介导转染小鼠Lewis肺癌细胞株。48h后,采用RT-PCR技术检测转染细胞中PARP-1基因mRNA的转录水平,筛选有效的PARP-1RNAi质粒。结果4种重组PARP-1RNAi质粒经酶切及测序证明构建正确。转染后48h,转染质粒pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1308和pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1837的Lewis细胞PARP-1基因mRNA的转录水平降低,转染pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1308组下降更明显,以其作为后续实验的有效质粒。结论已成功构建并筛选出PARP-1基因的RNAi表达质粒,为PARP-1基因RNAi治疗肿瘤的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1 siRNA 肿瘤 基因治疗 |
Construction and Screening of RNAi Expression Vector for Mouse Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | siRNA |
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