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烟叶铜锌超氧化物歧化酶的分离、纯化与性质
引用本文:郑晓云,王瑞,甘学文,陈晶波.烟叶铜锌超氧化物歧化酶的分离、纯化与性质[J].烟草科技,2007(4):40-44.
作者姓名:郑晓云  王瑞  甘学文  陈晶波
作者单位:南京卷烟厂技术中心,南京市向阳工业园梦都路30号,210012
摘    要:先用50mmol/LpH7.6磷酸盐缓冲液(PBS)提取,再经55%~60%(质量分数)硫酸铵盐析分级分离、冷冻乙醇—氯仿沉淀除杂和丙酮再沉淀分级由成熟的K326鲜烟叶得到含CuZn-SOD的粗酶液,粗酶液经DEAE-52柱层析(20mmol/LPBS平衡洗脱6h,流速0.25mL/min;600mL20mmol/LPBS和600mL100mmol/LPBS线性梯度洗脱,流速0.25mL/min)和DEAE-52离子交换柱层析(30~100mmol/LPBS线性梯度洗脱,流速0.25mL/min),成功将3种CuZn-SOD同工酶分开;再通过G-75凝胶柱层析(10mmol/LpH7.6PBS洗脱,流速0.3mL/min)和-20℃下冷冻干燥,得到CuZnSODI和CuZnSODIII纯品,经测定,CuZnSODⅠ由302个氨基酸残基组成,其相对分子质量为36682Da,最大吸收波长262nm,最适pH6.0左右,最适温度40℃;CuZnSODⅢ含187个氨基酸残基,相对分子质量为22976Da,最大吸收波长269nm,最大荧光激发波长和发射波长分别为280和338nm,最适pH5.0~6.0,最适温度30℃。

关 键 词:铜锌超氧化物歧化酶  同工酶  烟叶
文章编号:1002-0861(2007)04-0040-06
修稿时间:2006年9月4日

Isolation, Purification and Trait of Cu, Zn SODs in Tobacco Leaves
ZHENG XIAO-YUN,WANG RUI,GAN XUE-WEN,CHEN JING-BO.Isolation, Purification and Trait of Cu, Zn SODs in Tobacco Leaves[J].Tobacco Science & Technology,2007(4):40-44.
Authors:ZHENG XIAO-YUN  WANG RUI  GAN XUE-WEN  CHEN JING-BO
Abstract:
Keywords:Superoxide dismutase  Isoenzyme  Tobacco leaf
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