基于柱前衍生化高效液相色谱法评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型 |
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引用本文: | 李汉兵,姚元发,莫泽君,忻锦霞.基于柱前衍生化高效液相色谱法评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型[J].浙江工业大学学报,2018,46(2):216-219. |
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作者姓名: | 李汉兵 姚元发 莫泽君 忻锦霞 |
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作者单位: | 1.浙江工业大学药学院,浙江杭州310014;2.浙江大学医学院附属第二医院,浙江杭州310009 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金资助项目(LY14H310003) |
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摘 要: | 培养C2C12成肌细胞并分化成骨骼肌细胞,取细胞培养液通过柱前衍生化,将葡萄糖与1-苯
基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)络合,使用Unisphere Aqua C18色谱柱(2.0mm×150mm,粒径3.5
μm)分离衍生化产物,流动相为V(10mmol/L乙酸铵(pH=5.30))∶V(乙腈溶液)=78∶22,流速
为1.0mL/min,检测波长为245nm,进样量为20μL,柱温30℃.葡萄糖质量浓度在100~500
mg/L范围内具有良好的线性,相关系数0.998 5;精密度、重复性良好,平均回收率100.26%,RSD
值为1.02%.地塞米松孵育处理的骨骼肌细胞在胰岛素刺激下对葡萄糖的摄取量与对照组相比显
著减少.结果显示:柱前衍生化高效液相色谱法可用于评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,为后续胰
岛素抵抗机制探讨及药物筛选打下基础.
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关 键 词: | 高效液相色谱 柱前衍生化 胰岛素抵抗 葡萄糖摄取 |
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