| 重组HIV-1 DNA疫苗工程菌中试发酵工艺的优化 |
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| 引用本文： | 宋英今,金宁一,李霄,田明摇,张立树,李昌. 重组HIV-1 DNA疫苗工程菌中试发酵工艺的优化[J]. 中国生物制品学杂志, 2010, 23(5) |
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| 作者姓名： | 宋英今 金宁一 李霄 田明摇 张立树 李昌 |
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| 作者单位： | 宋英今(天津大学农业与生物工程学院,天津,300072);金宁一,李霄,田明摇,张立树,李昌(解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程实验室,长春,130062) |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划资助项目("863"项目) |
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| 摘 要： | 目的优化重组HIV-1DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺。方法优化质粒转化条件,制备工程菌Jm109/pVAX1-MEGp24种子液,连续传30代,检测其遗传稳定性;优化培养基成分、补料基质、补料方式和培养时间,确定最佳发酵参数;并应用最佳发酵参数,于50L发酵罐进行3批中试规模的发酵,考察在发酵培养过程中质粒的稳定性和超螺旋质粒的比例。结果工程菌在连续传代30次后,质粒拷贝数基本保持稳定;最佳发酵参数为:采用以甘油为碳源的培养基,以梯度恒速流加方式补料,培养时间13h;通过3批稳定发酵,最终可获得湿菌67.0～68.6g/L,质粒含量可达1.62～1.73mg/g菌,超螺旋质粒的比例达93%以上。结论已建立了稳定的重组HIV-1DNA疫苗工程菌中试发酵工艺,为进一步规模化生产奠定了基础。
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| 关 键 词： | HIV-1 DNA疫苗 工程菌 发酵 |
Optimization of Pilot Fermentation Procedure of Recombinant E.coli Containing Plasmid pVAX1-MEGp24 as Therapeutic HIV-1 DNA Vaccine |
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| SONG Ying-jin,JIN Ning-yi,LI Xiao,et al. Optimization of Pilot Fermentation Procedure of Recombinant E.coli Containing Plasmid pVAX1-MEGp24 as Therapeutic HIV-1 DNA Vaccine[J]. Chinese Journal of Bilogicals, 2010, 23(5) |
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| Authors: | SONG Ying-jin JIN Ning-yi LI Xiao et al |
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| Affiliation: | SONG Ying-jin,JIN Ning-yi,LI Xiao,et al(College of Agricultural , Biological Engineering,Tianjin University,Tianjin 300072,China) |
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| Abstract: | Objective To optimize the pilot fermentation procedure of recombinant E.coli containing plasmid pVAX1MEGp24 as therapeutic HIV-1 DNA vaccine.Methods The condition for transformation of plasmid pVAX1-MEGp24 was optimized,based on which the seed liquid of recombinant E.coli Jm109/pVAX1-MEGp24 was prepared,subcultured for 30 passages and tested for genetic stability.The fermentation parameters such as composition of culture medium,the matrix for feeding,the mode of fed-batch and the time for culture were optim... |
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| Keywords: | HIV-1 |
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