利用CRISPR/Cas9技术的烟草NtLS基因敲除分析 |
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引用本文: | 王姗姗,杨军,王中,林福呈,潘婷,武明珠,张剑锋,曹培健,谢小东.利用CRISPR/Cas9技术的烟草NtLS基因敲除分析[J].烟草科技,2018(2). |
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作者姓名: | 王姗姗 杨军 王中 林福呈 潘婷 武明珠 张剑锋 曹培健 谢小东 |
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作者单位: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院;浙江大学;郑州大学; |
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摘 要: | 为了培育无腋芽或少腋芽烟草,基于CRISPR/Cas9系统,对烟草NtLS基因进行靶向基因组编辑,构建了2个特异靶向NtLS基因的CRISPR/Cas9载体cLS1和cLS2,并借助农杆菌介导的烟草转基因技术转化烤烟品种K326,获得20株抗卡那霉素的阳性烟株。10株阳性烟株经过PCR扩增、测序和比对,检测到2株发生蛋白翻译错误的T_0突变烟株。研究结果不仅为腋芽形成的分子机理研究创制了有价值的突变体,而且为培育无腋芽或少腋芽优质烤烟品系提供了遗传材料。
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