| 水肠杆菌肉碱脱水酶基因的克隆、测序与高效表达 |
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| 引用本文： | 范立强,杨冠珍,等.水肠杆菌肉碱脱水酶基因的克隆、测序与高效表达[J].粉末涂料与涂装,2002,15(3):138-142. |
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| 作者姓名： | 范立强 杨冠珍 |
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| 作者单位： | [1]华东理工大学生物化学研究所，上海200237 [2]中国科学院上海生物化学研究所，上海200031 |
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| 摘 要： | 目的 克隆并表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因。方法 用聚合酶链反应（PCR）从大肠杆菌K12s中扩增大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB，测定其DNA序列，将caiB基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET-28a( ）中，构建表达质粒pETCaiB，转化大肠杆菌BI21（DE3），用1mmol/L异丙基硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）诱导表达。结果 克隆得到的肉碱脱水酶编码基因caiB长度为1221bp，与文献报道值相比，DNA充列有26个不同，氨基序序列只有一个不同，即302位的丙氨酸变为苏氨酸，重组菌经IPTG诱导，可高效表达，SDS-PAGE分析表达蛋白相对分子质量约43000，表达产物含量占菌体总蛋白45%以上。结论 得到了高效表达肉碱脱水酶的重组菌，为制备L-肉碱创造了条件。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 肉碱脱水酶 测序 高效表达 L－肉碱 基因克隆 表达 |
| 修稿时间： | 2001年5月14日 |
Cloning,Sequencing and High Expression of E.coli Carnitine Dehydratase |
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