瘤胃菌中乳酸脱氢酶的异源表达与酶学性质研究 |
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引用本文: | 金紫阳,袁思棋,刘君.瘤胃菌中乳酸脱氢酶的异源表达与酶学性质研究[J].酿酒科技,2022(5):17-23+29. |
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作者姓名: | 金紫阳 袁思棋 刘君 |
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作者单位: | 四川轻化工大学生物工程学院,四川宜宾644000;四川轻化工大学生物工程学院,四川宜宾644000;宜宾五粮液集团有限公司,四川宜宾644000 |
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摘 要: | 乳酸脱氢酶(ldh)在辅酶 NAD+/NADH 的作用下能催化乳酸与丙酮酸的可逆转化。本研究从实验室保藏的瘤胃菌 R1 菌株中克隆出 ldh 基因并构建了 pEGX 6p-1-ldh 重组质粒,将其导入 E.coli BL21(DE3)中实现了 ldh 异源表达。通过生物信息学分析,ldh 呈疏水性,为胞外酶,不存在跨膜结构域,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,具有高度保守的功能位点和结构域。通过酶学性质分析,重组ldh 最适反应温度为 45 ℃,最适反应 pH6.5,Na+、Mn2+和Co2+对ldh酶活有促进作用。
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关 键 词: | 乳酸脱氢酶 异源表达 酶学性质 生物信息学 |
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