| 猪链球菌微滴数字PCR定量检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 石磊,温雯,陈洵,叶蕾,常彦磊,李丽丽.猪链球菌微滴数字PCR定量检测方法的建立[J].现代食品科技,2019,35(1):233-238. |
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| 作者姓名： | 石磊 温雯 陈洵 叶蕾 常彦磊 李丽丽 |
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| 作者单位： | 暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632;暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632;暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632;暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632;暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632;暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2016YFD0500600）；广东省科技计划项目（2017B020207004）；中央高校基本科研业务费项目（2017MS104；21618309） |
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| 摘 要： | 根据猪链球菌(Streptococcus suis,SS)gdh基因的保守序列设计特异性引物和Taq Man探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品的检测,建立可对其准确定量的微滴数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法进行比较分析。结果表明,该方法特异性良好,与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪圆环病毒2型和伪狂犬病毒无交叉反应;灵敏度优于qPCR,线性相关系数(R2)为0.991,呈良好线性关系,最低可检测到2.692 copies/μL的阳性质粒;稳定性好,变异系数为1.66%。临床样品定量检测结果表明,dd PCR具有敏感性高、特异性好等优点,能对qPCR检测的可疑样品进行精确定量。本研究建立的dd PCR能够准确定量检测SS,将为SS相关研究提供有益参考。
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| 关 键 词： | 猪链球菌 微滴数字PCR 检测方法 |
| 收稿时间： | 2018/9/26 0:00:00 |
Development of Droplet Digital PCR for the Detection of Streptococcus suis |
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| SHI Lei,WEN Wen,CHEN Xun,YE Lei,CHANG Yan-lei and LI Li-li.Development of Droplet Digital PCR for the Detection of Streptococcus suis[J].Modern Food Science & Technology,2019,35(1):233-238. |
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| Authors: | SHI Lei WEN Wen CHEN Xun YE Lei CHANG Yan-lei and LI Li-li |
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| Affiliation: | (Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China),(Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China),(Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China),(Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China),(Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China) and (Institute of Food Safety and Nutrition Jinan University, Guangzhou 510632, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptococcus suis (SS) droplet digital PCR (ddPCR) detection |
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