| 胭脂红酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 何峰容,杨帆帆,李佳楠. 胭脂红酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备[J]. 现代食品科技, 2019, 35(3): 270-274 |
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| 作者姓名： | 何峰容 杨帆帆 李佳楠 |
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| 作者单位： | 江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056;武汉云克隆科技股份有限公司,湖北武汉430056;武汉云克隆科技股份有限公司,湖北武汉,430056;江汉大学生命科学学院,湖北武汉,430056 |
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| 基金项目： | 武汉市黄鹤英才计划（2014） |
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| 摘 要： | 为了快速高效检测食品中胭脂红酸含量,本研究通过羟基二咪唑法制备了胭脂红酸人工抗原;通过免疫新西兰大耳白兔获得了胭脂红酸抗血清,经硫酸铵沉淀法分离纯化获得抗胭脂红酸多克隆抗体;利用棋盘滴定法检测了抗体效价,并探究了溶液pH值、离子强度和有机溶剂对ELISA反应的影响,优化出最佳ELISA反应条件;在最佳反应条件下,建立了胭脂红酸的间接竞争ELISA抑制曲线。紫外光谱扫描结果显示,免疫抗原(CA-BSA)和检测抗原(CA-OVA)均与载体蛋白成功偶联;经分离纯化获得的胭脂红酸多克隆抗体效价为1:16000;检测抗原最佳浓度为1μg/m L、ELISA反应最适缓冲液为pH7.4、含50mmol/L Na~+且无甲醇的磷酸盐缓冲液;间接竞争ELISA标准曲线的线性范围为7.8～1150ng/mL,检测限为1ng/mL,灵敏度IC_(50)值为95.2ng/mL。本研究为开发CA快速检测试剂盒对食品中胭脂红酸含量的大量快速测定奠定了基础。
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| 关 键 词： | 胭脂红酸 人工抗原 多克隆抗体 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
| 收稿时间： | 2018-09-28 |
Synthesis of Carminic Acid Artificial Antigen and Preparation Its Polyclonal Antibodies |
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| HE Feng-rong,YANG Fan-fan and LI Jia-nan. Synthesis of Carminic Acid Artificial Antigen and Preparation Its Polyclonal Antibodies[J]. Modern Food Science & Technology, 2019, 35(3): 270-274 |
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| Authors: | HE Feng-rong YANG Fan-fan LI Jia-nan |
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| Affiliation: | (1.Life Science College, Jianghan University, Wuhan 430056, China)(2.Wuhan Cloud-Clone Co. Ltd., Wuhan 430056, China),(2.Wuhan Cloud-Clone Co. Ltd., Wuhan 430056, China) and (1.Life Science College, Jianghan University, Wuhan 430056, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | carminic acid artificial antigen polyclonal antibody enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) |
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