| 含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌 |
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| 引用本文： | 申进玲,赵丽娜,蒋 原,韩 伟,袁辰刚. 含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌[J]. 食品安全质量检测学报, 2019, 10(7): 1844-1852 |
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| 作者姓名： | 申进玲 赵丽娜 蒋 原 韩 伟 袁辰刚 |
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| 作者单位： | 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心;上海海关;江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心 |
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| 基金项目： | 上海市技术标准专项(16DZ0500101)、江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心资助 |
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| 摘 要： | 目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的最适添加量为10~4copies/PCR。所建立方法对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的灵敏度分别达到4.7copies/PCR和5.23copies/PCR;对115株空肠弯曲菌、49株结肠弯曲菌和42株非目标菌株在3种不同类型的实时荧光PCR仪上的特异性均达到100%;对鸡肉中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出限达到10CFU/25g,与传统检测方法一致。采用所建立的方法对50份市售生鲜鸡肉进行检测发现,空肠弯曲菌阳性率为12%(6/50),结肠弯曲菌阳性率为4%(2/50);传统国标检测方法除了1份空肠弯曲菌阳性样品未得到分离确认,其余PCR阳性样品均在平板上分离确认。结论该方法特异性强、灵敏度高、开放性好、含有内标可防止"假阴性",可应用于食品中2种重要致病性弯曲菌的快速同步检测。
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| 关 键 词： | 弯曲菌 同步快速检测 内部扩增对照 |
| 收稿时间： | 2019-01-29 |
| 修稿时间： | 2019-03-22 |
Simultaneous detection of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using multiplex real-time PCR containing internal amplification control |
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| SHEN Jin-Ling,ZHAO Li-N,JIANG Yuan,HAN Wei and YUAN Chen-Gang. Simultaneous detection of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli using multiplex real-time PCR containing internal amplification control[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2019, 10(7): 1844-1852 |
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| Authors: | SHEN Jin-Ling ZHAO Li-N JIANG Yuan HAN Wei YUAN Chen-Gang |
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| Affiliation: | Technology Center for Animal Plant and Food Inspection and Qurantine, Shanghai Entry-Exit Inspection and Qurantine,Technology Center for Animal Plant and Food Inspection and Qurantine, Shanghai Entry-Exit Inspection and Qurantine,Shanghai Customs; Jiangsu Collaborative Innovation Center of Meat Production and Processing,Technology Center for Animal Plant and Food Inspection and Qurantine, Shanghai Entry-Exit Inspection and Qurantine and Technology Center for Animal Plant and Food Inspection and Qurantine, Shanghai Entry-Exit Inspection and Qurantine |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Campylobacter simultaneous and rapid detection internal amplification control |
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