| L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建 |
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| 引用本文： | 王婷,韩超,毛倩,张德志,蔡柠匀,刘宏亮,李燕军,陈宁.L-2-氨基丁酸大肠杆菌生产菌株的构建[J].食品与发酵工业,2019(3):56-63. |
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| 作者姓名： | 王婷 韩超 毛倩 张德志 蔡柠匀 刘宏亮 李燕军 陈宁 |
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| 作者单位： | 天津科技大学生物工程学院;代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室(天津科技大学);教育部工业发酵微生物重点实验室(天津科技大学) |
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| 摘 要： | L-2-氨基丁酸作为新型药物的关键手性前体,在化工和制药行业应用广泛。该文以1株生产L-苏氨酸的大肠杆菌(Escherichia coli) THRD为出发菌株,逐步延伸代谢途径,构建了L-2-氨基丁酸高产菌株。首先,分别把苏氨酸脱水酶编码基因ilv A2和ilv A4在THRD中过表达,菌株THRD/p Trc99a-ilv A2在5 L发酵罐中分批补料发酵,2-酮基丁酸积累量达到18 g/L。然后,分别与ilv A2串联表达酪氨酸转氨酶、谷氨酸脱氢酶和亮氨酸脱氢酶编码基因tyr B、gdh和bcdBS,将L-2-酮基丁酸转化为L-2-氨基丁酸,菌株THRD/p Trc99a-bcdBS-ilv A2的L-2-氨基丁酸产量达到19 g/L。最后,研究了阻断L-苏氨酸输出途径对发酵的影响,菌株THRDΔrht C/p Trc99a-bcdBS-ilv A2的L-2-氨基丁酸产量提升至22 g/L。因此,通过代谢途径延伸可以有效地将L-苏氨酸生产菌株转变为L-2-氨基丁酸生产菌株。该研究为L-2-氨基丁酸高产菌株的构建奠定了基础,且对其他延伸代谢途径获得新产品的代谢工程研究提供了参考。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 L-苏氨酸 L-2-酮基丁酸 L-2-氨基丁酸 转运途径 |
Construction of Escherichia coli strain producing L-2-aminobutyrate |
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| WANG Ting,HAN Chao,MAO Qian,ZHANG Dezhi,CAI Ningyun,LIU Hongliang,LI Yanjun,CHEN Ning.Construction of Escherichia coli strain producing L-2-aminobutyrate[J].Food and Fermentation Industries,2019(3):56-63. |
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| Authors: | WANG Ting HAN Chao MAO Qian ZHANG Dezhi CAI Ningyun LIU Hongliang LI Yanjun CHEN Ning |
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| Affiliation: | (College of Biotechnology,Tianjin University of Science and Technology(Tianjin University of Science and Technology),Tianjin 300457,China;National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology,Tianjin 300457,China;Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology,Ministry of Education(Tianjin University of Science andTechnology),Tianjin 300457,China) |
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| Abstract: | WANG Ting;HAN Chao;MAO Qian;ZHANG Dezhi;CAI Ningyun;LIU Hongliang;LI Yanjun;CHEN Ning(College of Biotechnology,Tianjin University of Science and Technology(Tianjin University of Science and Technology),Tianjin 300457,China;National and Local United Engineering Lab of Metabolic Control Fermentation Technology,Tianjin 300457,China;Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology,Ministry of Education(Tianjin University of Science andTechnology),Tianjin 300457,China) |
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| Keywords: | Escherichia coli L-threonine L-2-ketobutyrate L-2-aminobutyrate transport system |
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