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花生过敏原Ara h 1蛋白的原核表达及致敏性分析
引用本文:史云凤,张彤,陈沁.花生过敏原Ara h 1蛋白的原核表达及致敏性分析[J].食品科学,2019,40(6):121-127.
作者姓名:史云凤  张彤  陈沁
作者单位:上海大学生命科学学院,上海 200444
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(31201306)
摘    要:从花生中提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应得到花生过敏原Ara h 1基因,构建pET-28a-Ara h 1表达载体,转入Rosetta(DE3)宿主表达菌中诱导产物表达,用镍离子亲和层析法纯化得到目的蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示目的蛋白分子质量约为75 kDa,与预计相符;经质谱鉴定为Ara h 1蛋白。用BALB/c小鼠模型评价重组Ara h 1蛋白的致敏性结果显示,重组Ara h 1蛋白致敏小鼠血清中特异性抗体、Th2型细胞因子、组胺含量升高,空肠和肺组织发生病变,表明重组Ara h 1蛋白可以导致小鼠发生Th2型过敏反应,且有与天然Ara h 1蛋白相似的致敏性。同时RBL细胞模型结果显示重组Ara h 1蛋白还可导致RBL细胞脱颗粒,释放β-己糖苷酶,进一步表明重组Ara h 1蛋白具有致敏性。

关 键 词:Ara  h  1过敏原  重组蛋白  致敏性  BALB/c小鼠  RBL细胞  

Prokaryotic Expression of Peanut Allergen Ara h 1 and Its Allergenicity
SHI Yunfeng,ZHANG Tong,CHEN Qin.Prokaryotic Expression of Peanut Allergen Ara h 1 and Its Allergenicity[J].Food Science,2019,40(6):121-127.
Authors:SHI Yunfeng  ZHANG Tong  CHEN Qin
Affiliation:School of Life Science, Shanghai Univercity, Shanghai 200444, China
Abstract:
Keywords:Ara h 1 allergen  recombinant protein  allergenicity  BALB/c mice  RBL cell  
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