| 黑曲霉酸性蛋白酶EXPA的克隆表达与酶学性质解析 |
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| 引用本文： | 王鑫,金鹏,宋鹏,董自星,刘晓光,王正祥. 黑曲霉酸性蛋白酶EXPA的克隆表达与酶学性质解析[J]. 食品与发酵工业, 2019, 0(3): 40-46 |
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| 作者姓名： | 王鑫 金鹏 宋鹏 董自星 刘晓光 王正祥 |
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| 作者单位： | 工业发酵微生物教育部重点实验室(天津科技大学);天津科技大学化工与材料学院 |
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| 基金项目： | 天津市高等学校创新团队培养计划<酶与生物催化关键技术>(TD12-5002);天津市国际交流与合作项目(14RCG HSY00181) |
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| 摘 要： | 酸性蛋白酶在食品、酿造、饲料和皮革等行业具有重要的应用价值。然而,现有的酸性蛋白酶在50℃以上或pH> 3. 0时不稳定,限制了其应用范围。该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510的酸性蛋白酶基因exp A在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115 (p PIC-expA)。摇瓶发酵条件下,重组酶EXPA的酶活为257 380 RFU/h。生物信息学分析的结果显示,该酶属于天冬氨酸蛋白酶A1A家族。酶学性质的研究表明,该重组酶的最适反应温度和pH分别为50℃和3. 0;分别在40～50℃或pH 2. 5～3. 5孵育1 h后,仍能保留80%左右的活力。Zn2+、Ca2+、Fe2+和Mn2+对其活性有一定的促进作用;而Cu2+、Co2+、Fe3+、EDTA和SDS则对其活性有显著的抑制作用。此外,重组酶EXPA对大豆分离蛋白、水溶性玉米蛋白和小麦水解蛋白均具有较好的水解作用。较好的耐热性和pH稳定性为EXPA在食品、饲料等领域的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 酸性蛋白酶 黑曲霉 分子克隆 酶学特征 |
Cloning,expression and biochemical characterization of a novel acid protease EXPA from Aspergillus niger |
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| WANG Xin,JIN Peng,Song Peng,Dong Zixing,LIU Xiaoguang,WANG Zhengxiang. Cloning,expression and biochemical characterization of a novel acid protease EXPA from Aspergillus niger[J]. Food and Fermentation Industries, 2019, 0(3): 40-46 |
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| Authors: | WANG Xin JIN Peng Song Peng Dong Zixing LIU Xiaoguang WANG Zhengxiang |
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| Affiliation: | (Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology,Ministry of Education (Tianjin University ofScience and Technology),Tianjin 300457,China;College of Chemical Engineering and Materials Science,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin 300457,China) |
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| Abstract: | WANG Xin;JIN Peng;Song Peng;Dong Zixing;LIU Xiaoguang;WANG Zhengxiang(Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology,Ministry of Education (Tianjin University ofScience and Technology),Tianjin 300457,China;College of Chemical Engineering and Materials Science,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin 300457,China) |
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| Keywords: | acid protease Aspergillus niger molecular cloning enzymatic properties |
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