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HIV-1C亚型调控蛋白Nef在大肠杆菌中的表达
引用本文:戴青,孙明,周东霞,蒋国润,黄小琴,褚嘉祐.HIV-1C亚型调控蛋白Nef在大肠杆菌中的表达[J].粉末涂料与涂装,2006,19(4):347-348.
作者姓名:戴青  孙明  周东霞  蒋国润  黄小琴  褚嘉祐
作者单位:中国医学科学院 中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,中国医学科学院,中国协和医科大学,医学生物学研究所中心实验室,昆明650118,昆明650118,昆明650118,昆明650118,昆明650118,昆明650118
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:目的表达人免疫缺陷病毒1型C亚型调控蛋白Nef,为研制HIV疫苗寻找新的途径。方法通过PCR扩增,获得HIV-1C亚型Nef基因片段,并将其克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE和Westernblot分析表达产物。结果表达产物是相对分子质量为50000的GST融合蛋白,且能与p27单克隆抗体发生特异性反应。结论重组Nef蛋白在大肠杆菌中得到了有效表达。

关 键 词:人免疫缺陷病毒Ⅰ型  Nef蛋白  原核表达
修稿时间:2005年10月18

Expression of Regulatory Protein Nef of HIV-1 Subtype C in E. coli
DAI Qing,SUN Ming,ZHOU Dong-xia,et al.Expression of Regulatory Protein Nef of HIV-1 Subtype C in E. coli[J].Chinese Journal of Biologicals,2006,19(4):347-348.
Authors:DAI Qing  SUN Ming  ZHOU Dong-xia  
Abstract:Objective To express the regulatory protein Nef of HIV-1 subtype C in E.coli.Methods Amplify the Nef gene fragment of HIV-1 subtype C by PCR and clone into prokaryotic expression vector pGEX-5X-1,then transform to E.coli BL21(DE3) for expression under induction of IPTG.Identify the expressed product by SDS-PAGE and Western blot.Results The GST fusion protein with a relative molecular weight of 50 000 was expressed and showed specific reaction with McAb against p27.Conclusion Recombinant Nef protein was successfully expressed in E.coli.
Keywords:HIV-1  Nef protein  Prokaryotic expression
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