| 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 王耀,李燕虹,吴佳蓓,邢云瑞,曹金博,陈秀金,李兆周,邓瑞广,胡骁飞.大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国食品学报,2020,20(7):216-221. |
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| 作者姓名： | 王耀 李燕虹 吴佳蓓 邢云瑞 曹金博 陈秀金 李兆周 邓瑞广 胡骁飞 |
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| 作者单位： | 河南科技大学食品与生物工程学院；食品加工与安全国家级实验教学示范中心；河南省农业科学院；河南省动物免疫学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31702218）；国家科技支撑计划项目（2014BAD13B05）；河南省自然科学基金项目（182300410038）；河南省高等学校重点科研项目（18B550001）；河南省动物免疫学重点实验室开放课题（PKLAI20170603） |
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| 摘 要： | 为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子（BBI）单克隆抗体（mAb），以50 μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠，采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合，多次筛选得到分泌BBI mAb的稳定杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明：1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好，半数抑制浓度（IC50）为868.58 ng/mL。经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞，其中3B7-B10 mAb效价达到1 ∶ 4.096×105以上，亚型为IgG1型，IC50为83.07 ng/mL，具有亲和力较高且特异性强的优点，表明所制备的mAb免疫学特性良好，能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础。
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| 关 键 词： | 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子 单克隆抗体 免疫学特性 |
Preparation and Identification of Bowman-Birk Inhibitor Monoclonal Antibody |
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