| 数字PCR定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌方法的研究 |
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| 引用本文： | 赵丽青,方佩佩,唐 静,马 云,李正义,王昌军,苏 倩,贾俊涛,姜英辉.数字PCR定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌方法的研究[J].食品安全质量检测技术,2017,8(11):4133-4138. |
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| 作者姓名： | 赵丽青 方佩佩 唐 静 马 云 李正义 王昌军 苏 倩 贾俊涛 姜英辉 |
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| 作者单位： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,中国海洋大学食品科学与工程学院,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
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| 基金项目： | 国家质检总局科技计划项目(2013IK175, 2014IK 024, 2016IK198) |
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| 摘 要： | 目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的分析方法。方法选择基因hly A为靶序列,设计PCR扩增引物和Taq Man探针,优化反应条件和反应体系,通过细菌分离和dd PCR方法对靶标基因的检测特异性、灵敏度和重复性进行实验,并对定量结果进行分析。结果 ddPCR反应中的最佳探针浓度为5 pmol/μL,特异性好,检出限为(3.6±0.1)copies/20μL,重复性实验良好,标准偏差为0.067%。ddPCR的拷贝数(copy number)与细菌密度(colony forming units,CFU/mL)形成了较好的线性关系。结论本研究建立dd PCR的拷贝数和菌液密度或菌落数的线性关系,可以为单核细胞增生李斯特氏菌的快速定量检测提供参考。
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| 关 键 词： | 单核细胞增生李斯特氏菌 微滴式数字PCR 定量 |
| 收稿时间： | 2017/8/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/11/9 0:00:00 |
Detection of Listeria monocytogenes in foods by droplet digital PCR |
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| ZHAO Li-Qing,FANG Pei-Pei,TANG Jing,MA Yun,LI Zheng-Yi,WANG Chang-Jun,SU Qian,JIA Jun-Tao and JIANG Ying-Hui.Detection of Listeria monocytogenes in foods by droplet digital PCR[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2017,8(11):4133-4138. |
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| Authors: | ZHAO Li-Qing FANG Pei-Pei TANG Jing MA Yun LI Zheng-Yi WANG Chang-Jun SU Qian JIA Jun-Tao and JIANG Ying-Hui |
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| Affiliation: | Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,College of Food Science amd Engineering, Ocean University of China,Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau and Technical Center of Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Listeria monocytogenes droplet digital PCR quantitation |
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