黑曲霉SH-2基因组中注释的7个α-葡萄糖苷酶基因的鉴定与表达分析 |
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引用本文: | 杨海燕,潘力,王斌.黑曲霉SH-2基因组中注释的7个α-葡萄糖苷酶基因的鉴定与表达分析[J].现代食品科技,2017,33(6):80-86. |
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作者姓名: | 杨海燕 潘力 王斌 |
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作者单位: | (华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006),(华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006),(华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006) |
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基金项目: | 广东省科技计划项目(2016A050503016、S2012030006235、2016A010105004);华南理工大学中央高校基本科研业务费资助项目(2015ZP032、2015ZZ040) |
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摘 要: | 已公布的黑曲霉CBS513.88基因组中注释了7个α-葡萄糖苷酶基因信息,但其中主要高活性基因一直未报道。本文通过同源重组构建了黑曲霉SH-2菌株7个α-葡萄糖苷酶基因的系列多重敲除株。α-葡萄糖苷酶活性测定结果显示仅agdB敲除株的酶活相较于野生株SH-2降低36%,而其余多重敲除株菌株酶活影响较小。以敲除糖化酶、淀粉酶背景的黑曲霉SH-2-3菌株为宿主,分别敲除和过量表达基因agdB及与已报道的黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因序列相似度最高的基因agdA,结果显示agdB敲除株生长速度在不含葡萄糖的培养条件下最慢,并随着葡萄糖添加量增加;agdB过量表达株酶活提高到野生型的10倍。本研究结果说明目前黑曲霉SH-2基因组中所注释的7个α-葡萄糖苷酶基因中仅agdB为主要高活性α-葡萄糖苷酶基因(占总体酶活36%),黑曲霉SH-2中α-葡萄糖苷酶基因仍需进一步探索。
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关 键 词: | 黑曲霉 α-葡萄糖苷酶 基因敲除 基因表达 |
收稿时间: | 2016/10/17 0:00:00 |
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