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呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制
引用本文:李春生,刘静静,杜顺丰,武孝丽,曹秀梅,吴萌,张娜.呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制[J].现代食品科技,2017,33(6):326-331.
作者姓名:李春生  刘静静  杜顺丰  武孝丽  曹秀梅  吴萌  张娜
作者单位:(1.河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081),(1.河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081),(2.秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛 066001),(2.秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛 066001),(2.秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛 066001),(1.河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081),(1.河北省科学院生物研究所,河北石家庄 050081)
基金项目:河北省科技支撑计划项目(15273205D)
摘    要:本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株诱生腹水后,经纯化即为单克隆抗体,用于胶体金标记,制备呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条。融合后得到2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中4G3纯化后的抗体效价达到1:100万,对CPAOZ的50%抑制质量浓度(IC50)为1.7 μg/L,亲和常数Ka=1.6×109 L/mol。该抗体制备的胶体金试纸条的检测限为4 μg/L,与其他3种硝基呋喃代谢物的衍生物CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反应,对样品的检测与高效液相色谱结果一致。本研究制备了抗呋喃唑酮代谢物特异性单克隆抗体,并研制了以单抗为基础的胶体金免疫层析试纸条,能够实现呋喃唑酮代谢物残留的快速、灵敏的检测。

关 键 词:呋喃唑酮代谢物  单克隆抗体  胶体金免疫层析试纸条
收稿时间:2016/8/3 0:00:00

Preparation of Monoclonal Antibody and Colloidal Gold Immunochromatographic Test Strip against Furazolidone Metabolites
LI Chun-sheng,LIU Jing-jing,DU Shun-feng,WU Xiao-li,CAO Xiu-mei,WU Meng and ZHANG Na.Preparation of Monoclonal Antibody and Colloidal Gold Immunochromatographic Test Strip against Furazolidone Metabolites[J].Modern Food Science & Technology,2017,33(6):326-331.
Authors:LI Chun-sheng  LIU Jing-jing  DU Shun-feng  WU Xiao-li  CAO Xiu-mei  WU Meng and ZHANG Na
Affiliation:(1.Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang 050081, China),(1.Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang 050081, China),(2.Qinhuangdao City Agricultural Products Quality and Safety Supervision and Inspection Center, Qinhuangdao 066001, China),(2.Qinhuangdao City Agricultural Products Quality and Safety Supervision and Inspection Center, Qinhuangdao 066001, China),(2.Qinhuangdao City Agricultural Products Quality and Safety Supervision and Inspection Center, Qinhuangdao 066001, China),(1.Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang 050081, China) and (1.Biology Institute, Hebei Academy of Sciences, Shijiazhuang 050081, China)
Abstract:
Keywords:furazolidone metabolites  monoclonal antibody  colloidal gold immunochromatographic test paper
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