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重组大肠杆菌产Bacillus subtilis 168来源γ-谷氨酰转肽酶的摇瓶发酵优化
作者姓名:陈星奕  宿玲恰  吴敬
作者单位:食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122
摘    要:为实现来源于Bacillus subtilis的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)高效胞外分泌表达,以基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-20b(+)/ggt为出发菌株,对其发酵产酶的诱导条件和培养基进行优化。最终确定其最优发酵培养基为:10 g/L甘油,21 g/L酵母粉,7 g/L蛋白胨,130 mmol/L磷酸盐;发酵条件为:37℃、200 r/min培养4 h,加入0.2 mmol/L IPTG后转入25℃,诱导40~48 h,优化后酶活达到81.2 U/m L,是未优化前的1.9倍。本研究结果为目前国内报道大肠杆菌摇瓶发酵产γ-谷氨酰转肽酶的最高酶活,为该酶的工业化生产奠定了基础。

关 键 词:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);γ-谷氨酰转肽酶;重组大肠杆菌;发酵优化
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