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双孢蘑菇来源非特异性过氧合酶在毕赤酵母中的表达及生化表征
引用本文:庞能威,杨博,王永华. 双孢蘑菇来源非特异性过氧合酶在毕赤酵母中的表达及生化表征[J]. 现代食品科技, 2021, 37(1): 31-37
作者姓名:庞能威  杨博  王永华
作者单位:华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州 510640
基金项目:国家自然科学基金重点项目(31930084);国家自然科学基金杰出青年科学基金项目(31725022);广东省MEPP基金项目(GD.GDOE [2019] A20)
摘    要:本研究以来源于(Agaricus bisporus var. bisporus,Abvb)的非特异性过氧合酶AbvbUPO为目标蛋白,实现了其在毕赤酵母GS115中的异源分泌表达。Westernblot检测结果表明重组AbvbUPO分子量为35ku。酶生化表征研究发现,非特异性过氧合酶AbvbUPO的最适反应温度和pH分别为35℃和3.0。通过过氧化氢耐受性实验,发现2 mM以上的过氧化氢会导致AbvbUPO钝化。为保持AbvbUPO在反应过程中的活力,原位生成过氧化氢的AbvbUPO酶级联催化反应被应用于其催化能力的鉴定。以乙基苯为底物的AbvbUPO酶级联催化反应,经过4h的反应后,产物β-苯乙醇的得率可达14.40%。上述研究表明,AbvbUPO是一种不耐受高温和高浓度过氧化氢的中温酶,但在原位生成过氧化氢的级联反应中AbvbUPO可保持良好的催化性能。本研究为非特异性过氧合酶的异源表达和生物催化应用提供了一个良好的借鉴。

关 键 词:双孢蘑菇  非特异性过氧合酶  异源表达  羟基化
收稿时间:2020-03-22

Expression and Biochemical Characteristics of Unspecific Peroxygenase Derived from Agaricus bisporus var. bisporus in Pichia pastoris
PANG Neng-wei,YANG Bo,WANG Yong-hua. Expression and Biochemical Characteristics of Unspecific Peroxygenase Derived from Agaricus bisporus var. bisporus in Pichia pastoris[J]. Modern Food Science & Technology, 2021, 37(1): 31-37
Authors:PANG Neng-wei  YANG Bo  WANG Yong-hua
Affiliation:(1.School of Biology and Biological Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China); (2.School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)
Abstract:
Keywords:Agaricus bisporus var. bisporus   unspecific peroxygenase   heterologous expression   hydroxylation
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