| 黄色短杆菌ilvBN和ilvC基因定点突变对L-缬氨酸发酵的影响 |
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| 引用本文： | 宫卫波,王海雷,程国平,赵津津.黄色短杆菌ilvBN和ilvC基因定点突变对L-缬氨酸发酵的影响[J].发酵科技通讯,2017(4):228-232,237. |
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| 作者姓名： | 宫卫波 王海雷 程国平 赵津津 |
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| 摘 要： | 以黄色短杆菌MH-1000为出发菌株,使用PCR技术克隆ilvBN与ilvC基因,对ilvBN进行定点突变,获得解除L-缬氨酸对乙酰羟酸合酶反馈抑制突变型基因ilvBN′.对基因ilvC进行点突变,获得乙酰羟酸变位酶突变基因ilvC′.通过重叠延伸PCR方法,将基因片段ilvBN′和ilvC′拼接为ilvBN′C′,进而连接至穿梭载体pXMJ19获得重组质粒pXMJ19-ilvBN′C′.该重组质粒转化至出发菌株获得工程菌株MH-1032.50L分批补料发酵结果显示:MH-1000发酵72hL-缬氨酸质量浓度为35.2g/L,MH-1032发酵72 h L-缬氨酸质量浓度为38.4 g/L,增长9.1%,糖酸转化率从21.7%提高到25.8%.
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Site-directed mutagenesis of ilvBN and ilvC in Brevibacterium flavum for improved production of L-valine |
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