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| 人丙酮酸羧化酶异位表达提高中国仓鼠卵巢细胞补料分批培养后期活率 | |
| 引用本文： | 付托,张存超,靖钰,蒋成,张学光,寇庚. 人丙酮酸羧化酶异位表达提高中国仓鼠卵巢细胞补料分批培养后期活率[J]. 化学与生物工程, 2013, 30(6): 39-42 |
| 作者姓名： | 付托 张存超 靖钰 蒋成 张学光 寇庚 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学医学生物技术研究所,江苏苏州215007;第二军医大学肿瘤研究所,上海200433 2. 第二军医大学肿瘤研究所,上海,200433 3. 苏州大学医学生物技术研究所,江苏苏州,215007 |
| 基金项目： | 国家863计划资助项目 |
| 摘 要： | 构建了人丙酮酸羧化酶(hPC)异位表达的重组CHO细胞,并检测了重组细胞生长情况的改变。利用分子生物学实验技术构建hPC-pcDNA 3.0表达载体,将其转染CHO-K1细胞;转染细胞经过G418抗性筛选后,通过荧光定量PCR检测目的基因表达,并挑选表达量最高的克隆进行补料分批培养。电泳及测序结果显示,构建的hPC-pcDNA3.0表达载体序列与预期一致;在mRNA水平鉴定目的基因显示,4#克隆的mRNA表达水平最高;选其进行补料分批培养,生长曲线显示在培养后期,其活细胞密度和细胞活率均高于对照。成功构建了细胞生长和活率改善的重组CHO细胞,获得了生长改善的细胞株,为后续的重组蛋白表达研究与细胞培养工艺优化奠定了基础。 |
| 关 键 词： | CHO细胞 丙酮酸羧化酶 补料分批培养 活率 |
Increase of Viability of Chinese Hamster Ovary Cells in Late Phase of Fed-Batch Culture by Ectopic Expression of Human Pyruvate Carboxylase |
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| FU Tuo , ZHANG Cun-chao , JING Yu , JIANG Cheng , ZHANG Xue-guang , KOU Geng. Increase of Viability of Chinese Hamster Ovary Cells in Late Phase of Fed-Batch Culture by Ectopic Expression of Human Pyruvate Carboxylase[J]. Chemistry & Bioengineering, 2013, 30(6): 39-42 | |
| Authors: | FU Tuo ZHANG Cun-chao JING Yu JIANG Cheng ZHANG Xue-guang KOU Geng |
| Affiliation: | 1.Medical Biotechnology Institute,Soochow University,Suzhou 215007,China; 2.Second Military Medical University,Shanghai 200433,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Chinese hamster ovary(CHO) cells pyruvate carboxylase fed-batch culture viability |
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