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粮油作物中伏马菌素B1免疫测定方法的建立
引用本文:胡骁飞,王方雨,邢广旭,杨继飞,张改平,邓瑞广.粮油作物中伏马菌素B1免疫测定方法的建立[J].中国粮油学报,2015,30(7):116-122.
作者姓名:胡骁飞  王方雨  邢广旭  杨继飞  张改平  邓瑞广
作者单位:1. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,郑州,450002
2. 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南农业大学,郑州450002
基金项目:公益性行业(农业)科研专项兽药残留新型快速检测技术及产品研发(201203040),河南省农业科学院优秀青年科技基金项目基于噬菌体展示的霉菌毒素安全检测新技术研究(2013YQ29)
摘    要:旨在制备伏马菌素B_1单克隆抗体,并建立伏马菌素B_1免疫学检测方法。以制备的免疫原FB_1-BSA免疫小鼠,利用细胞融合技术建立能分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水的方法制备FB_1单抗。基于制备的FB_1单抗,建立间接竞争ELISA检测分析方法,并对检测方法性能进行了初步鉴定。结果表明,通过动物免疫、细胞融合筛选到1株分泌抗FB_1抗体的杂交瘤细胞株3F6。建立的间接竞争ELISA检测分析方法检测范围40~600 ng/mL之间,检测下限达到40 ng/mL,半数抑制浓度IC_(50)为136.81 ng/mL,除与FB1特异性反应外,与同系物FB2及FB3交叉反应率分别为11.65%和7.85%,与黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素M_1、β-玉米赤霉烯醇、呕吐毒素、T-2毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇交叉反应率均低于0.2%,样品回收率在88.89%到115.45%之间,平均101.91%,变异系数为7.43%。本研究建立的ELISA方法与LC-MS-MS检测相同的样品时,二者的检测结果没有显著差异(P0.05)。本研究初步研发出灵敏度符合检测要求、特异较强、准确度较高、简便快捷的FB1免疫学检测方法 。

关 键 词:粮油作物  伏马菌素B1  细胞融合  单克隆抗体  免疫检测
收稿时间:2014/2/21 0:00:00
修稿时间:6/3/2014 12:00:00 AM

Establishment of Immunoassay Methods to Detect Fumonisin B1 in Grain and Oil Crops
Hu Xiaofei , Wang Fangyu , Xing Guangxu , Yang Jifei , Zhang Gaiping , Deng Ruiguang.Establishment of Immunoassay Methods to Detect Fumonisin B1 in Grain and Oil Crops[J].Journal of the Chinese Cereals and Oils Association,2015,30(7):116-122.
Authors:Hu Xiaofei  Wang Fangyu  Xing Guangxu  Yang Jifei  Zhang Gaiping  Deng Ruiguang
Abstract:
Keywords:Grain and Oil Crops  Fumonisin B1  Cell Fusion  Monoclonal Antibody  Immunoassay
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