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呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮单克隆抗体的制备、鉴定与胶体金免疫层析试纸条的研制
引用本文:张晓丽,颜露,向军俭,邹军辉,唐勇.呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮单克隆抗体的制备、鉴定与胶体金免疫层析试纸条的研制[J].食品工业科技,2013,34(13).
作者姓名:张晓丽  颜露  向军俭  邹军辉  唐勇
作者单位:广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,暨南大学抗体工程中心,广东广州510632
基金项目:广东省教育部"产学研"结合项目
摘    要:目的:制备5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮(AMOZ)单克隆抗体,并建立AMOZ胶体金试纸条检测方法.方法:AMOZ与对醛基苯甲酸反应生成半抗原CP-AMOZ,将CP-AMOZ与BSA、OVA偶联制备完全抗原.免疫小鼠后制备腹水型抗体,ELISA检测抗体效价与其对CP-AMOZ半抑制浓度(IC50)和最低检测限(LOD),并检测抗体的特异性.胶体金与单抗偶联,同时在NC膜上包被完全抗原、兔抗鼠多抗分别作为检测线和质控线,制备免疫层析试纸条,测定试纸条的灵敏度与特异性.结果:成功制备CP-AMOZ-BSA、CP-AMOZ-OVA完全抗原及抗CP-AMOZ的单抗,抗体效价为1∶1.6×105,对CP-AMOZ IC50为0.86μg/L,LOD 0.07 μg/L,与其他硝基呋喃类药物代谢物及其衍生物均无交叉反应.制备的胶体金试纸条灵敏度5 μg/L.结论:成功合成了CP-AMOZ的完全抗原,免疫小鼠后制备了特异性强的单抗,并以此为基础研制出敏感、特异的胶体金快速检测试纸条.

关 键 词:CP-AMOZ  单克隆抗体  胶体金  免疫层析

Production and characterization of monoclonal antibody against the metabolite of furaltadone,5-morpholino-3-amino-2-oxazolidone (AMOZ), and establishment of colloidal gold immunochromatography for detecting
Abstract:
Keywords:CP-AMOZ  monoclonal antibody  colloidal gold  immunochromatography
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