酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析 |
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引用本文: | 酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析[J]. 食品工业科技, 2013, (13): 157-160. DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2013.13.050 |
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作者姓名: | 宋冬梅 朱益波 周丽丽 郑丽雪 齐斌 |
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作者单位: | 1. 吉林农业大学,食品科学与工程学院,吉林长春130118 2. 常熟理工学院发酵工程技术研究中心,苏州食品生物技术重点实验室,江苏常熟215500 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目,2011年度常熟理工学院"青蓝工程"优秀青年骨干教师培养对象 |
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摘 要: | γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,重组菌经诱导表达后,测得GSHI的酶活力为46.09U/mg湿菌,活性较高。进一步利用生物信息学方法分析和预测GSHI基因的序列和蛋白结构,为在基因水平上提高该酶的表达量和活性提供了理论依据。
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关 键 词: | 谷胱甘肽 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 序列分析 表达 |
收稿时间: | 2012-11-02 |
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