| 表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶的重组腺病毒的构建及其免疫原性 |
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| 引用本文： | 严敏,孙茂盛,王文举,谢天宏,李太华,李鸿钧. 表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶的重组腺病毒的构建及其免疫原性[J]. 中国生物制品学杂志, 2011, 24(11) |
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| 作者姓名： | 严敏 孙茂盛 王文举 谢天宏 李太华 李鸿钧 |
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| 作者单位： | 严敏 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； 孙茂盛 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； 王文举 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； 谢天宏 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； 李太华 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； 李鸿钧 (中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明,650118) ； |
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| 摘 要： | 目的构建表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的重组腺病毒,并检测其免疫原性。方法从质粒pMD19T-simple-NA中扩增NA基因,克隆至穿梭质粒pShuttleCMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-NA,RT-PCR和免疫荧光法检测NA基因在Vero细胞中的转录和表达。CsCl密度梯度离心纯化重组腺病毒,免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗NA抗体滴度。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定表明带有目的基因的穿梭质粒已整合到腺病毒基因组中;NA基因在Vero细胞中成功转录和表达;重组腺病毒可刺激小鼠产生抗NA抗体,初免后4周,抗体水平达最高,为1∶100 000。结论成功构建了表达甲型H1N1流感病毒NA蛋白的重组腺病毒,其可刺激小鼠产生有效的免疫应答,为甲型H1N1流感病毒基因工程疫苗的研发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 流感病毒A型,H1N1亚型 神经氨酸酶 重组腺病毒 免疫原性 |
Construction and Immunogenicity of Recombinant Adenovirus for Expression of Neuraminidase of Influenza A(H1N1) Virus |
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| Keywords: | Influenza A,H1N1 subtype Neuraminidase(NA) Recombinant adenovirus Immunogenicity |
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