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粗糙脉孢菌漆酶基因的克隆及在毕赤酵母中的初步表达
引用本文:谌斌,唐雪明,沈微,方惠英,诸葛健. 粗糙脉孢菌漆酶基因的克隆及在毕赤酵母中的初步表达[J]. 食品与生物技术学报, 2006, 25(4): 43-47
作者姓名:谌斌  唐雪明  沈微  方惠英  诸葛健
作者单位:1. 江南大学,工业生物技术教育部重点实验,江苏,无锡,214036;广西师范大学,资源与环境学系,广西,桂林,541004
2. 江南大学,工业生物技术教育部重点实验,江苏,无锡,214036
基金项目:教育部重点实验室基金;江南大学校科研和教改项目
摘    要:采用连续延伸PCR方法克隆到粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)漆酶基因,并将其克隆到表达载体pPIC9k,重组质粒经线性化、电激转化Pichia pastoris KM71,部分阳性克隆的PCR结果表明:漆酶基因已整合到巴斯德毕赤酵母染色体上,重组菌经甲醇诱导后3~5d产漆酶量最高,为2-3U/mL。

关 键 词:粗糙脉孢菌  漆酶  连续延伸PCR方法  巴斯德毕赤酵母
文章编号:1673-1689(2006)04-0043-04
修稿时间:2005-06-08

Cloning of a Laccase Gene from Neurospora crassa and It''s Preliminary Expression in Pichia pastoris
CHEN Bin,TANG Xue-ming,SHEN Wei,FANG Hui-ying,ZHUGE Jian. Cloning of a Laccase Gene from Neurospora crassa and It''s Preliminary Expression in Pichia pastoris[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2006, 25(4): 43-47
Authors:CHEN Bin  TANG Xue-ming  SHEN Wei  FANG Hui-ying  ZHUGE Jian
Abstract:A laccase gene(lac) from Neurospora crassa was cloned using successive PCR method.The gene,lac,was inserted into the expression vector pPIC9k,and then transformed into the Pichia pastoris KM71.PCR results indicated that the laccase gene from Neurospora crassa has been successfully integrated into the chromosome of Pichia pastoris.The highest laccase activity of the positive recombinant strain reached 2~3 U/mL by induction with methanol for 3~5 days.
Keywords:Neurospora crassa  laccase  a successive PCR method  Pichia pastoris
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