新生小鼠骨骼肌成肌细胞分离和分化方法研究

建立一个高效的分离和分化小鼠成肌细胞的方案,以便探讨MAML1在转基因小鼠中肌管的形成和肌肉发生中的作用。使用细胞分化方法鉴定MAML1在肌肉发生中的作用。使用Western blot检测肌肉发生的标志蛋白肌球蛋白Myosin的表达。研究发现,传代次数少于5次及卫星细胞对成肌细胞在体外形成正确的肌管非常重要。不传代直接进行诱导分化,能促使成肌细胞形成更多的肌管。在MAML1转基因小鼠中,MAML1通过促进形成更多、更粗壮而长的肌管,提高肌球蛋白的蛋白水平来促进肌肉发生。这些MAML1转基因的肌管能够持续存在超过5天,然后才会降解。